,هورمونی,الایزا,کیت,آزمایشگاه,فاسکو
 
 
0 نظرات  عوامل تاثیر گذار بر حساسیت و اختصاصیت تست های عفونی در کیت های الایزا
  تاریخ : ۱۳۹۰ چهارشنبه ۲۳ آذر  [0:50]  

 

عوامل تاثیر گذار بر حساسیت و اختصاصیت تست های عفونی در کیت های الایزا
1)      میزان عدم دقت کیت
2)      میزان حساسیت آنالایتیکال کیت
3)      میزان اختصاصیت آنالایتیکال کیت
4)      نوع آنالیت های مورد جستجو توسط کیت
5)      بررسی اثرات مداخله گرها
6)     جمعیت مورد مطالعه 
 
 
جمعیت مورد مطالعه - قسمت دوم
 
دوم اینکه هر چه میزان جمعیت مورد مطالعه وسیع تر باشد شانس پیدا کردن نمونه هایی که با تیتر بسیار بالاتر از آنچه که تا حال پیدا کرده اند بیشتر می شود و کمپانی سازنده چاره اندیشی را به موقع می تواند انجام دهد و یا همینطور است در مورد یافتن نمونه هایی که کمپانی اساسا ممکن است چاره و راه کاری برای برطرف کردن بعضی نمونه ها نداشته باشد و کمپانی سازنده مجبور باشد این موارد را به عنوان موارد مثبت کاذب ویا منفی کاذب بالاجبار در شاخص های کیت خود بگنجاند ، دوباره به راحتی می شود استنباط کرد که میزان اعتماد به شاخص های حساسیت و اختصاصیت تشخیصی کیتی که جمعیت مورد مطالعه آن وسیعتر است بیشتر است.



2 نظرات  روش های تغییر یافته PCR
  تاریخ : ۱۳۹۰ چهارشنبه ۱۶ آذر  [13:14]  

آرتي-پي‌سي آر (‏RT-PCR‏)‏
‏ اين روش به ‏PCR‏ نسخه‌ برداري معكوس نيز معروف است كه ماده اوليه در آن ‏RNA‏ است. اولين مرحله در اين روش تبديل ‏RNA‏ به ‏DNA‏ (‏DNAاي كه مكمل توايس‌هاي ‏mRNA‏ است) توسط آنزيم نسخه‌ بردار معكوس صورت مي‌گيرد (‏RT‏). برخي از موجودات مانند برخي از ويروس‌هاي ‏RNAدار، ژنومشان تنها از ‏RNA‏ ساخته شده است. بعضي از ويروس‌ها مانند ويروس هپاتيت ‏B‏ هرگز به شكل ‏DNA‏ مابين در اثر آنزيم نسخه‌ بردار معكوس در نمي‌آيد. آنزيم نسخه‌ بردار معكوس (‏RT‏) در اين روش از "‏Avian Myeloblastosis Virus (AMV)‎‏" و "‏Moloney Murine Leu Kemia Virus (MMLV)‎‏ " به‌ دست آمد.
كاربرد اين آنزيم به‌ دليل آن‌كه آنزيم به حرارت حساس بود در ابتدا پايين بود ولي با كشف باكتري به نام "ترموس ترموفيلوس" يك ‏DNA‏ پليمر از مقاوم به نام (‏Tth‏) بهبود يافت كه در حضور يون ‏Mn+2‎‏ داراي فعاليت نسخه‌ برداري معكوس است و در دماي 72 درجه سانتيگراد توسط اين آنزيم از روي ‏RNA، ‏DNA‏ ساخته مي‌شود و سپس ‏Mn+2‎‏ اضافي توسط اتيلن گليكول تترااستيك اسدي (‏EGTA‏) حذف مي‌شود و سپس اين آنزيم از ‏DNAاي كه خود ساخته استفاده و آن را تكثير مي‌كند.‏


آرمز پي‌سي‌آر (‏ARMS-PCR‏)‏
‏ اين روش تكثيري قدرتمند براي مشخص كردن جهش‌هاي نقطه‌اي است. در اين روش از پرايمرهاي جهش يافته و طبيعي در دو لوله جداگانه استفاده مي‌شود. اگر عمل پليمريزاسيون در لوله حاوي پرايمر طبيعي انجام شود، نشان‌دهنده نبود جهش نقطه‌اي در باز مورد نظر است و اگر عمل پليمريزاسيون در لوله‌ حاوي پرايمر جهش يافته انجام شود، نشان‌دهنده حضور جهش نقطه‌اي در باز مورد نظر است. اين روش نام‌هاي ديگري نيز دارد از جمله ‏MAMA-PCR‏ مخفف ‏Amplificatin Multation Assay‏ ‏Mismatch‏ و ‏COP-PCR‏ مخفف ‏Competitive Oligonucleotide Primming‏. ‏


نستد پي‌سي‌آر (‏Nested-PCR‏)
در اين روش از دو جفت پرايمر استفاده مي‌شود، طوري كه جفت دوم در بني جفت اول جاي مي‌گيرد. در اين روش ابتدا پرايمر بيروني توالي هدف در طول 30-15 چرخه تكثير مي‌شود، سپس محصول ‏PCR‏ حاصل به لوله‌اي ديگر منتقل مي‌شود و به‌عنوان الگو و با استفاده از جفت پرايمر داخلي مرحله دوم ‏PCR‏ انجام شده و ترادف كوچكتري از ‏DNA‏ كه درون ‏PCR‏ اولي است، به اندازه 40-15 چرخه تكثير مي‌شود.‏
مزاياي اين روش تغيير يافته ‏PCR‏ عبارت است از:

1) نياز به پروب (كاوشگر) و تأييدهاي بعدي كمتر است

2) حساسيت در اين روش به ميزان زيادي بالاتر است و

3) به دليل انتقال محصول ‏PCR‏ دور اول به لوله جديد، ممانعت كننده‌ها رقيق مي‌شود. اين روش در تعيين جنسيت جنين در سه ماهه اول بارداري استفاده شده و از اين طريق توانسته‌اند بيماري‌هاي وابسته به جنس را تعيين كرده و از تولد كودكان بيمار جلوگيري كنند.‏


همچنين ويروس "سيتومگالوويدوس" كه مي‌تواند سبب ناشنوايي در 1% از كودكان شود، توسط اين روش تشخيص داده شده و امكان درمان زود هنگام از اين طريق امكان‌پذير است. جنين‌هاي مبتلا به سندروم داون نيز در مرحله بارداري مادر با اين روش تشخيص داده شدند.


‏Real-Time PCR
‏ به علت ورود نسل جديدي از ترموسايكلرها با سيستم فلورومتري كه اجازه پايش پيوسته خاصيت فلوئورسانس محصول ‏PCR‏ در زمان جمع شدن را مي‌دهد، اين روش ابداع شد. در اين روش از كاوشگرها يا پروب‌هاي هيبريداسيون نشان‌دار شده با رنگ‌هاي فلورسانس در انتهاي 5 يا 3 استفاده مي‌شود. كه امكان پايش پيوسته محصول ‏PCR‏ را بدون جداسازي آنها در روش‌هاي الكتروفورز در ژل آگاروز يا ژل پلي آكريل آميد مي‌دهد. اين سيستم در سال 1992 كشف شد. اين روش به دليل كاهش زمان سيلك‌هاي ‏PCR، حذف مرحله ‏Post-PCR‏ و كاربرد نشانگرهاي فلوروژنيك و روش‌هاي حساس آشكارسازي تابش آنها باعث افزايش سرعت اين سيستم نسبت به سيستم ‏PCR‏ معمولي شده است. سازندگان و كاربران اين روش سعي مي‌كنند محصول ‏PCR‏ كوچك‌تر طراحي كنند تا سرعت افزايش يابد اما تجربه نشان داده كه كاهش اندازه محصول لزوماً بازده ‏PCR‏ را بهينه نمي‌كند. البته اين روش داراي معايبي نيز است از جمله مي‌توان به عدم ناتواني در مشخص كردن اندازه محصول بدون باز كردن سيستم و ناسازگار بودن برخي پلت فرم‌ها با شيمي برخي رنگ‌هاي فلورژنيك اشاره كرد. براي شناسايي بسياري از ويروس‌هاي عامل بيماري‌هاي انسان از اين روش استفاده شده است. 








نظرات :
نام کاربری :
نام رمز :
 

آدرس این وب لاگ
 
مدير کنترل کیفي سايت
Phasco-qc
آرشيو نوشته ها
1396/6   1390/9   1389/4  
1394/9   1390/8   1389/2  
1394/6   1390/5   1389/12  
1393/10   1390/4   1389/11  
1392/5   1390/3   1389/10  
1391/7   1390/2   1388/8  
1391/2   1389/9   1388/7  
1391/11   1389/5   1388/6  
1391/1  
پیوندها
کلیه حقوق معنوی و مادی این سایت برای شرکت تحقیقاتی تولیدی فارمد آوران سبز محفوظ است 2017®

اگزاسیلین, سوش, پيلوري, نمونه‌های بیولوژیک مانند خون، ادرار، مدفوع و انواع میکروب‌ها و ویروس‌ها, نابودی سلول های سرطانی, caspases, کرومزومها, bacteria, دانشگاه علوم پزشکی, سرطان معده, MCV, آئروسل, میکروسیتیک, ﮐﺮوﻣﻮزوﻣﯽ, ثبت‌ نام آزمون بورد دندانپزشکی, سولفوریک, کونژوگه, آندومتریوم, پراکسیدازهای, DEHYROGENASE, كريستال, داروي گياهي انعقاد خون, عوامل ایجاد خطا در تست‌های الایزا, pia, ویتامین, انتروكوليتيكا, Prophage, سرولوپلاسمین, Sodium, تگومنت, فاسیولیده, باکتریوری, میلوییدی, سلول‌های بدخیم, باکتریوفاژها, پولیپ معده, خودایمنی, استریلیزاسیون, تولید هیدروکربن های آروماتیک, مولکولهای, سندرم نفروتیک, نرمال, انجمن دکترای علوم آزمایشگاهی, E.coli, sample, لاکتیس, نفروتیک, نازایی, واکسینیا, سیستم گردش خون کرونر, استراز, میکروب شناسی, چرا یک آزمایشگاهی موفق هستید؟, Macrocyte, ويروس‌هاي, کلروفورم, نماز, فسفریله, دکتر مارگارت چان, ویسکوزیته‌ای, يرسينيا, ﺗﮑﻨﯿﮏ, مالتوز, APO A, لنکومایسین, دیوکسین, کلاژنها, ساژیناتا, توكسوپلاسموز, محلولی,