بازگشت دوباره

۱۳۹۴ شنبه ۲۳ آبان 10:53 | n421

نظرات : 1

 سلام به همه دوستای عزیز بعداز غیبت طولانی باز برگشتم .امیدوارم اینجا پر انرژی مثبت باشه مثل گذشته ...

سوگند نامه برای آزمایشگاهیان

۱۳۹۱ چهارشنبه ۲۴ خرداد 0:24 | n421

نظرات : 5

 بعد از مدتی که به سایت فاسکو آمدم طبق معمول اول  به بخش پرسش و پاسخ سایت سری زدم .یکی از کاربران در مورد سوگند نامه آزمایشگاهی سوال کرده بودند . از آنجایی که سوگند نامه ای برای رشته و شغل آزمایشگاه وجود ندارد پیشنهاد میکنم باهمکاری و همفکری اعضای سایت ، یک متن زیبا و جالب و پرمعنا طراحی کنیم و آخرین و بهترین ویرایش را به عنوان سوگند نامه آزمایشگاهیان منتشر کنیم . از همین الان منتظر دریافت متن های زیبا و پیشنهادهای دوستان هستیم . در ضمن اگر کسی به سوگند نامه لویی پاستو دسترسی دارد به عنوان یک پیشفرض برای شروع از آن استفاده خواهیم کرد. .... 1- (نقل از وبلاگ آقای پورسعید): وصیت نامه لویی پاستور:  در هر حرفه و شغلی که هستید نه اجازه دهید که به بدبینی های بی حاصل آلوده شوید و نه بگذارید که بعضی لحظات تاسف بار که برای هر ملتی پیش می آید شما را به یاس و نا امیدی بکشاند.در آرامش حاکم بر آزمایشگاه ها و کتابخانه هایتان زندگی کنید. نخست از خود بپرسید: “من برای یادگیری خود چه کرده ام؟” سپس همچنان که پیش تر می روید بپرسید: “من برای کشورم چه کرده ام؟” و این پرسش را آنقدر ادامه دهید تا به این احساس شادی بخش و هیجان انگیز برسید که: “شاید سهم کوچکی در پیشرفت و اعتلای بشریت داشته اید.”  اما صرفه نظر از هر پاداشی که زندگی به تلاش هایمان بدهد یا ندهد، آنگاه که لحظه مرگ فرا می رسد هر کدام از ما باید این حق را داشته باشیم که با صدای بلند بگوییم:«من آنچه در توان داشته ام انجام داده ام»‌ پیشنهاد نفرات بعدی یا ویرایش اینجا ثبت میشه :   2-پیشنهاد بعدی "به نقل از کامنت آقای سعادت :بند اول : ((سوگند یاد می‌کنم که اگر دانش و اطلاعات لازم و کافی برای انجام یک آزمایش ، با کیفیتی مطلوب را نداشته باشم ، دست به نمونة بیمار نخواهم زد)) فکرش رو بکنید اگر جملة فوق یکی از بندهای سوگندنامه باشه چند تن از ما آزمایشگاهیان باید بشینیم خونه و چند تا از آزمایشگاه‌های کشور باید تعطیل بشند !!!   3-  نقل از کاربرvesali: سلام پیشنهاد بسیار خوبی ست البته اگر اشاره به دقت در تشخیص هم بشه یعنی در حد یک جمله آخر مطلب یا هرجایی که صلاح می دونید مثلا اینکه هرگز از یاد مبر که چشمان منتظر بیمار به دستان پر مهارت و چشمان تیزبین توست  4-   ????  

لحظه های آرامش

۱۳۹۰ چهارشنبه ۷ دي 4:28 | n421

نظرات : 2

شما چون فصلهای سال هستید ، زیرا در زمستان خود بهار را انکار می کنید ، در حالی که بهار سرسبز هرگز شما را انکار نمی کند ، بلکه در سنگین ترین خواب غفلت به روی شما لبخند می زند ، بی آنکه خشمگین شود و یا با شما ستیز کند و صفا و یکرنگی را نادیده بگیرد .  جبران خلیل جبران

دستورالعمل ساخت انواع محیطها ی کشت و محلولهای مورد نیاز میکروب شناسی

۱۳۹۰ دوشنبه ۵ دي 12:56 | n421

نظرات : 1

 دستورالعمل تهيه انواع محيط هاي کشت، معرفها و رنگ هاي مصرفي در آزمايشگاه ميکروب شناسي، به شرح ذيل مي باشد: روش تهيه انواع محيط هاي کشت دهيدراته و استريليزاسيون آنها روش کار بر اساس دستورالعمل موجود بر روي قوطي هاي حاوي انواع محيط هاي کشت مي باشد. روش استريليزاسيون نيز بر روي برچسب دستورالعمل تهيه محيط کشت درج گرديده است . اين دستورالعمل ها بر حسب نوع محيط کشت و کارخانه توليدکننده، متفاوت است. محيط هاي کشت دهيدراته شامل: بايل اسکولين آگار، بي س موت ،(BHB/BHA) برين هارت آگار و براث ،(B.A) آگار بي هوازي، بلاد آگار سولفيت آگار، بروسلا مديوم ، کوک دميت براث ، کمپيلوباکتر سلکتي و آگار، کری بلر ، کازو آگار و براث آگار، هموفيلوس سلکتيو آگار، هکتون انتريک EMB ، تست آگار DNase ، مديوم CTA ،(TSA/TSB) لوون اشتاين جنسن مديوم ، ،(LDS) لايزين دکربوکسيلاز سولفيدراز مديوم ،(KIA) آگار، کلايگلر آيرون آگار براث ، مانيتول MRVP ،(MHA/MHB) لوفلر بلاد سرم، لايزين آيرون آگار، مولر هينتون آگار و براث نيترات براث ، اورني تين ،(N.A/N.B) سالت آگار، مک کانکی آگار، مالونات براث، نوترينت آگار و براث بازال مديوم، پپتون واتر، فنيل آلانين آگار ، فنل رد براث و OF ، دکربوکسيلاز آرژينين دهيدرولاز تست براث سلنيت براث ، تريپل شوگر ،(S.S) مديوم، سالمونلا شيگلا آگار SIM ، آگار، پپتون آگار، سيمون سيترات آگار آگار و ساير محيط های XLD ، آگار، تايو گليکولات براث، اوره آگار و براث TCBS ،(TSI) آيرون آگار کشت دهيدراته که در دفتر راهنمای محيط های کشت ثبت شده اند می باشد. روش تهيه محيط کشت ژلاتين (ترکيبي) ۵ g = پيتون ۳ g = Beef Extract ۱۲۰ g = ژلاتين ۱۰۰۰ آب مقطر اضافه کرده و در بن ماري جوش قرار دهيد تا كاملاً حل شوند (از حرارت cc مقادير فوق را به ۱۲۱ در فشار oC دادن اين محيط کشت بر روي شعله پرهيز كنيد). سپس در اتوكلاو به مدت ۱۵ دقيقه و دمای ۶ برسانيد / محيط کشت را به ۸ PH ۱۵ ) استريل نماييد. سپس در لوله تقسيم کرده و Lb) ۱۵ پوند ترکيبي) ) APW روش تهيه محيط کشت آب پپتونه قليايي يا ۱۰g = پيتون ۱۰g =(Nacl) کلرور سديم ۱۰۰۰cc = آب مقطر   ۱۵ در اتوکلاو قرار داده و استريل نماييد. دما Lb ۸ برسانيد و در شرايط ۱۵ دقيقه, فشار /۶- را به ۹ pH سپس ۱ استفاده کنيد) N ۱۲۱ است. ( براي تنظيم از سود oC نيز روش تهيه محيط کشت حاوي گليسرين جهت ديپ فريز BHB يا محيط کشت (Trypticase Soy Broth) TSB از محيط کشت پايه: محيط استفاده کنيد. به ميزان ۱۵ % گليسرين به محيط پايه اضافه نماييد. به (Brain Heart Infusion Broth) ۱) در لوله هاي درپيچ دار -۲ ml) خوبي تکان دهيد تا محلول يکنواختي حاصل شود. سپس در مقادير کم ۱۵ اتوکلاو نماييد. Lb ۱۵ دقيقه و فشار ، ۱۲۱ oC تقسيم نموده و در شرايط ۶% (براث/ آگار) /۵ NaCl روش تهيه محيط کشت ۰% نمک / محيط پايه همان محيط برين هارت اينفيوژن براث/آگار است. از آنجا كه اين محيط کشت حاوي ۵ ۶% نمک حاصل شود . شرايط / مي باشد، بنابراين ۶% نمک به اين محيط پاي ه اضافه نمايي د تا مقدار ۵ ۱۵ و زمان ۱۵ دقيقه مي باشد. Lb ۱۲۱ ، فشار oC استريليزاسيون همان دماي روش تهيه انواع قندها: (۱۰۰cc = ۱۰ و آب مقطر g = محلول ۱۰ % از انواع قندها تهيه نماييد (قند روش استريليزاسيون قندها استفاده از فيلتراسيون مي باشد. در غير اينصورت مي توان همه انواع قندها را در فشار ۵ به مدت ۵ دقيقه استريل نمود. Lb اگر بخواهيد قندها را از هم تفکيک نماييد، شرايط استريليزاسيون براي انواع لاکتوز، مالتوز، گزيلوز، ساليسين، ۱۲۱ به مدت ۳ دقيقه و شرايط استريليزاسيون براي oC ۱۵ ، دماي Lb سوکروز، ترهالوز و آرابينوز شامل فشار ۱۱۶ و زمان ۱۵ دقيقه مي باشد. -۱۱۸ oC ۱۰ ، دماي -۱۲ Lb ساير قندها شامل فشار روش تهيه انواع معرف ها و رنگ ها VP روش تهيه معرف هاي :(A - تهيه آلفا نفتول (معرف ۵ g : پودرآلفا نفتول ۱۰۰cc : اتانول :(B پتاس) (معرف ) KOH -تهيه ۴۰g :KOH ۰/۳ g :(cr) کراتين ۱۰۰cc : آب مقطر   معرف ها در ظروف تيره و در يخچال نگهداري مي شوند. چون داراي پايداري متغير هستند لازم است ب ه طور هفتگي (بر حسب ميزان کار) کنترل کيفي گردند. (MR) روش تهيه معرف متيل رد ۰/۱ g = پودر متيل رد ۳۰۰cc = اتانول ۵۰۰ برسانيد. معرف در ظرف تيره و در cc پودر متيل رد را در اتانول حل کرده سپس با آب مقطر حجم آنرا به يخچال نگهداري مي شود. چون داراي پايداري متغير است، لازم است بطور هفتگي (بر حسب ميزان کار) کنترل کيفي گردد. روش تهيه معرف کواکس ۱۰g = دي متيل آمينو بنز آلدئيد -P ۱۵۰cc : آميل الکل ۵۰cc : اسيد کلريدريک غليظ و تازه دي متيل آمينو بنزآلدئيد را به آميل الکل اضافه نموده و به آرامي اسيد کلريدريک را به آنها اضافه نماييد. براي تهيه اين معرف از هود استفاده نماييد. معرف در ظر وف تيره و در يخچال نگهداري مي شود . چون داراي پايداري متغير است، لازم است بطور هفتگی (برحسب ميزان کار) کنترل کيفي گردد. روش تهيه معرف کلرور فريک ۱۰g = کلرور فريک ۱۰۰ (روش غير اسيدي) cc = آب مقطر ۱۰۰cc ۲ و آب مقطر /۵cc : ۱۲ ، اسيد کلريدريک غليظ g : (روش ديگر تهيه اين معرف شامل کلرور فريک مي باشد، که اين روش، روش اسيدي است). معرف در ظروف تيره و در يخچال نگهداري مي شود . چون داراي پايداري متغير است، لازم است بطور هفتگی (برحسب ميزان کار) کنترل کيفي گردد. روش تهيه معرف هاي احياء نيترات :A -تهيه معرف ۶g : دي متيل آلفا نفتيل آمين N ،N ۱۰۰۰cc :( %۳۰) ،۵N اسيداستيک گلاسيال ۵ حل کرده و N ۱۰۰۰ اسيد استيک گلاسيال cc دي متيل آلفا نفتيل آمين را در کمتر از N ،N مقدار فوق از کمي حرارت ملايم دهيد تا حل شود. حجم را به يک ليتر رسانيده، محلول را از صافي رد کنيد. آزمايشگاه مرجع سلامت دستورالعمل :B -تهيه معرف ۸g :( آمينو بنزن سولفونيک اسيد -P) سولفانيليک اسيد ۱۰۰۰ cc :( %۳۰) ،۵N اسيداستيک گلاسيال ۱۰۰۰ اسيداستيک حل کرده و سپس حجم را به يک لي تر cc مقدار فوق از سولفانيليک اسيد را در کمتر از برسانيد. معرف ها در ظروف تيره و در يخچال نگهداري مي شوند. آلفا نفتيل آمين سرطان زا است. روش تهيه معرف نين هيدرين ۳/۵ g = پودر نين هيدرين ۵۰ cc = استن ۵۰ cc = بوتانول استن و بوتانل را مخلوط کرده و سپس پودر نين هيدرين را اضافه نماييد. معرف در ظرف تيره و در دماي اتاق نگهداري مي شود. درب آن بايد کاملاً محکم بسته شود. K روش تهيه ويتامين 1 ۰/۲g =k پودر ويتامين 1 ۲۰cc = اتانول محلول در ظرف تيره و در يخچال نگهداري مي شود. درب ظرف بايد کاملاً محکم بسته شود . غلظت نهايي ۰ پودر ويتامين /۲g . ۱۰ براي محيط هاي آگاردار است μg/ml ۰ براي محيط هاي مايع و /۱ μg/ml محلول ۲۰ اتان ول در ml را روي يک قطعه کوچک فويل آلومينيومي استريل وزن کرده و در شرايط آسپت يک به K1 يک بطري استريل اضافه کنيد. براي رقيق سازي بيشتر از آب مقطر استريل استفاده کنيد . محلول ذخيره ۰ براث اضافه کنيد. محلول را د ور از /۰۱ ml/l ۱ از محلول ذخيره را به يک ليتر آگار و ml . ۱۰ است mg/ml نور و در يخچال ذخيره کنيد. (Haemine) روش تهيه همين ۰/۵ g = پودر همين ۱۰cc =۱N (NaOH) سود ۱۰ سود ۱ نرمال اضافه کرده و حل کني د، سپس با آب مقطر به حجم cc مقدار فوق از پودر همين را به ۱۵ در اتوکلاو استريل نماييد. Lb ۱۲۱ ، فشار oC ، ۱۰۰ برسانيد. در شرايط ۱۵ دقيقه cc ۵ غلظت دارد، ولي هنگام mg/ml محلول در ظرف تيره و در يخچال نگهداري مي شود. اين محلول ذخيره ۵ باشد. μg/ml مصرف به عنوان ساپلمنت، بايد داراي غلظت نهايي آزمايشگاه مرجع سلامت دستورالعمل   %۳ (H2O روش تهيه آب اکسيژنه ( 2 ۹cc ۱ آب اکسيژنه ۳۰ % را به cc محلول آب اکسيژنه ۳۰ % را به نسبت ۱:۱۰ با آب مقطر رقيق نماييد. (يعني آب مقطر اضافه نماييد). محلول در ظرف تيره و در يخچال نگهداري مي شود. روش تهيه کريستال ويوله ذخيره و اگزالات آمونيوم ذخيره -تهيه کريستال ويوله ۲۰g = پودر کريستال ويوله ۱۰۰cc = اتانول -تهيه اگزالات آمونيوم ۱g = پودر اگزالات آمونيوم ۱۰۰cc = آب مقطر هنگام مصرف، محلول کريستال ويوله ذخيره را به نسبت ۱:۱۰ با آب مقطر رقيق نماييد. ۹ آب مقطر) سپس اين محلول را با چهار حجم از cc ۱ از محلول کريستال ويوله و cc) ۴ اگزالات آمونيم). cc ۱ محلول کريستال ويوله رقيق شده و cc) محلول اگزالات آمونيم رقيق کنيد محلول ذخيره و مصرفی کريستال ويوله، در ظرف تيره و در دماي اتاق نگهداري مي شود. روش تهيه لوگل ۱g = يد ۲g = يدور پتاسيم ۲۴۰cc = آب مقطر ۶۰cc =% محلول آبي بيکربنات سديم ۵ ۲۴۰ برسانيد . cc در مقدار کمي از آب مقطر، يد و يدور پتاسيم را کاملاً حل نماييد، بعد حجم را با آ ب مقطر به ۱۰۰ ) را نيز به آن اضافه نماييد . محلول در c : ۵ آب مقطر g : محلول ۵% بيکربنات سديم (بيکربنات سديم دمای اتاق نگهداری می شود . درب آنرا بايد کاملا" محکم ببنديد. روش تهيه محلول الکل-استون ۲۵۰cc = اتانول ۲۵۰cc = استون حجم مساوي از الکل اتيليک (اتانول) را با استون مخلوط نماييد.   روش تهيه فوشين/ يا سافرانين ذخيره ۲g = پودر فوشين ۱۰۰cc = اتانول و يا ۲/۵g = پودر سافرانين ۱۰۰cc = اتانول به هنگام مصرف، محلول ذخيره فوشين يا محلول ذخيره سافرانين را به نسبت ۱:۱۰ با آب مقطر رقيق نماييد . محلولها در ظروف تيره، تهيه و در دمای اتاق ذخيره می شوند.     دانلود متن اصلی دستوالعمل 

کنترل کیفیت دیسکهای آنتی بیوگرام -قسمت دوم

۱۳۹۰ جمعه ۲ دي 11:37 | n421

نظرات : 4

 - آزمايش کنترل کيفي هفتگي را يکبار در هفته و هم چنين زمانيکه يکي از عوامل آزمايش (مانند سري ساخت آگار يا ديسکهای تهيه شده از يک سازنده) تغيير کند، انجام دهيد. اگر هر يک از نتايج کنترل کيفي هفتگي خارج از محدوده قابل قبول باشد ، انجام اقدامات اصلاحي مورد نياز است . (Corrective actions) اقدامات اصلاحي الف _ نتايج خارج از محدوده قابل قبول به دليل خطاهاي مشهود و واضح شامل: - استفاده از ديسک اشتباه - استفاده از سويه کنترلی اشتباه - آلودگي واضح سويه - استفاده غيرعمدی از دما و شرايط اشتباه انکوباسيون بوجود آمده است . دراين حال بايد دليل ايجاد خطا مکتوب و پس از اصلاح آزمايش دوباره تکرار شود . اگر نتايج گزارش شده در محدوده مورد نظر قرار گرفت ، عمليات اصلاحي بيشتري مورد نياز نمي باشد . ب _ عامل ايجاد نتايج خارج از محدوده کنترل نامشخص است. در اين حال بايد اقدامات اصلاحي فوري بشرح زير انجام شود. - آزمايش را جهت يک سويه کنترلي / ديسک آنتي بيوتيکي براي ۵ روز متوالي تکرار و همه نتايج را ثبت کنيد. ۳ ( ضميمه ۳) و در محدوده قابل قبول باشد A - اگر اندازه هر ۵ قطرهاله مطابق جداول ۳ و ، عمليات اصلاحي بيشتري مورد نياز نمي باشد. - اگر اندازه هر يک از ۵ قطر هاله عدم رشد خارج از محدوده قابل قبول باشد ، به عمليات اصلاحي اضافي نياز است. - آزمايشهاي کنترلي روزانه بايد ادامه داده شود تا به دليل نهايي مشکل پي برده شود. عمليات اصلاحي اضافي: وقتي عمليات اصلاحي فوري مشکل را حل نکرد، احتمالا" خطاي مشاهده شده بعلت بروز يك اشکال کلي در سيستم و نه يک خطاي تصادفي ايجاد شده است. در اين حالت بايد موارد بيشتري بررسي شوند. مانند: - اندازه گيري و ثبت صحيح قطر هاله هاي عدم رشد     - رعايت تاريخ انقضا و شرايط نگهداري ديسکها و مواد مورد استفاده (دور از رطوبت و در دماي مناسب) - مناسب بودن دما و اتمسفر انکوباتور - تغييرنيافتن يا آلوده نبودن سويه هاي کنترل - مطابقت صحيح سوسپانسيون تلقيح با استاندارد نيم مک فارلند - استفاده از پليت کشت تازه برای تلقيح (پليت کشت بايد تازه بوده و مدت زمان انكوباسيون آن بيشتر از ۲۴ ساعت نباشد) وقتي مشکل بر طرف شد، می توان کنترل کيفي هفتگي را برقرار کرد. نگهداري ديسکهاي آنتي بيوتيکي ۱۴ - و پايين تر تا زمان مصرف نگهداري شوند. ˚C ۸ و پايين تر ، يا در فريزر ˚C - ديسکها بايد در يخچال - تمامي ديسکهاي گروه بتالاکتام مانند پني سيلين، آمپي سيلين، کربني سيلين ، تيکارسيلين، اگزاسيلين و نسل اول، دوم و سوم سفالوسپورين ها و ... بايد در فريزر نگهدار ي شوند ، و فقط مي توان مقداري از آن را بر اساس کار روزانه آزمايشگاه حداکثر به مدت يک هفته در يخچال نگهداري نمود. - بعضي آنتي بيوتيکهاي حساس مثل ايميپنم ، سفاکلر و ترکيبات کلاولانيک اسيد يا سولباکتام اگر تا هنگام مصرف در فريزر نگهداري شوند، پايداري بيشتري خواهند داشت. - ديسکها بايد در ظروف داراي درپوش محکم و حاوي مواد جاذب رطوبت نگهداري شوند. - ديسکهای آنتي بيوتيکي بايد يك تا دو ساعت قبل از استفاده از يخچال يا فريزر خارج شوند تا به درجه حرارت اتاق برسند.